Набор для транскрипции mMESSAGE mMACHINE™ T7 ULTRA AM1345

Набор mMESSAGE mMACHINE® T7 Ultra Kit сочетает в себе новый аналог кэпа - антиреверсивный аналог кэпа (ARCA) - с запатентованной технологией высокопроизводительной транскрипции, позволяющей генерировать РНК-транскрипты, которые при трансляции дают более высокий выход белка по сравнению с другими транскриптами. Преимущества набора mMESSAGE mMACHINE® T7 Ultra Kit:- синтез большего количества белка из транскрибированной in vitro РНК- более эффективная экспрессия РНК транскриптов как in vitro, так и in vivo- стабилизация транскриптов in vivo с помощью реагентов для поли(А) хвостовРНК с кэпом ARCA трансляционно более активнаМодификация оснований в ARCA приводит к тому, что он встраивается только в функциональной, транслируемой ориентации, тогда как традиционный кэп-аналог может быть встроен как в функциональной, так и в нефункциональной ориентации. В результате при включении ARCA в реакции транскрипции получаются кэппированные РНК, транслируемые на 100%. Этому способствует включение поли(А) хвостов в транскрипты mMESSAGE mMACHINE® T7 Ultra. Эксперименты по сравнению транскриптов ARCA и ARCA/поли(А)-хвост с кэп-аналогом и кэп-аналогом/поли(А)-хвост указывают на более высокий уровень синтеза белка при использовании кэппированной РНК ARCA. Что такое ARCA? ARCA - это модифицированный кэп-аналог, в котором 3' OH-группа (ближе к m7G) заменена на OCH3 (см. схему). Благодаря этой замене РНК-полимераза может инициировать транскрипцию только с оставшейся гидроксильной группой, что вынуждает встраивать ARCA в прямой ориентации. В результате 100% транскриптов, синтезированных с ARCA на 5' конце, являются транслируемыми, что приводит к сильному стимулирующему эффекту на трансляцию. Правильное кэпирование транскрибируемой in vitro РНКПравильное кэпирование РНК способствует правильному началу синтеза белка, а также стабильности и процессингу мРНК in vivo. После микроинъекции или трансфекции в клетки некэппированная РНК быстро разрушается клеточными РНКазами. Кроме того, кэппированная РНК обычно транслируется более эффективно в системах трансляции in vitro, в результате чего образуются РНК с кэп-аналогом, включенным только в функциональной ориентации. Поэтому замена традиционного кэп-аналога на ARCA приводит к синтезу кэппированных РНК, которые транслируются на 100%.